Információ a kolloid aranyoldatok előkészítéséről az antigénteszthez

Az kolloid arany oldatának előállítása antigénteszt a trisodium -citrát redukciós módszert alkalmazza a kolloid arany oldat előállításához. Vegyünk 1000 ml ultrapure vizet, és melegítsük egy mágneses keverőhöz forrásig, adjunk hozzá 40 ml 1% klórsav -oldatot, amikor az oldat ismét forr, gyorsan adjon hozzá 36 ml 1% -os trisodium -citrát oldatot, folytassa a forralást, amikor az oldat színe lila 5 percet fordít, kapcsolja be a fűtőberendezést, és az eredeti térfogatra az ultrapure vízhűtés után az eredeti térfogatra hűvös vízzel. A kolloid arany részecskék átlagos átmérőjének és zeta potenciálját nanorészecskeméret -elemzővel mértük, és szobahőmérsékleten sötétben tároltuk. Tehát mi az információ a kolloid aranymegoldások előkészítéséről az antigén teszthez? Vessen egy pillantást.

Itt van a tartalomlista:

l A kolloid arany jelölt konjugátumok előkészítése

l gyors antigén tesztcsíkok előkészítése

l Minimális észlelési határérték

l stabilitási teszt

Kolloid arany jelölt konjugátumok készítése

Vegyünk 100 ml antigénteszt-kolloid aranyat két tiszta főzőpohárba, az optimalizált jelölt pH-feltételek szerint adjunk hozzá 3,3 ml és 2,1 ml 0,1 mol/l kálium-karbonátot a pH-k beállításához, keverjük össze egy mágneses keverővel 300 r/perc sebességgel, és adjunk hozzá egér-n-protein monoklonális antitestet és Dnp-BSA protein-t, és keverjük az 1 mg-t, és keverjük az egér-n protein monoklonális antitestet és a DNP-BSA fehérjéket; 2 ml 10% BSA -oldatot adunk hozzá, és 2 ml 10% BSA -oldatot adunk hozzá, és a keverést 20 percig folytattuk; Keverés után az antigénteszt -kolloid aranyoldatot két 50 ml -es centrifugacsőbe vittük át, a centrifuga paraméterek 9000 r/perc, 20 perc és 4 ° C volt, és centrifugálást végeztünk. A centrifugálás után óvatosan vegye ki a centrifugacsövet, ne rázza meg, távolítsa el a felülúszót egy pipettával, gyűjtse össze a csapadékot, rekonstruálja azt konjugátum hígítószerrel 10 ml -ig, és 4 ° C -on tárolja sötétben. Az antigénteszt -kolloid aranykonjugált részecskék átlagos átmérőjű és zeta potenciálját nanorészecskeméret -elemzővel mértük.

Gyors antigén tesztcsíkok előkészítése

A mintapadot egyenletesen bevontuk a mintapad -kezelési oldattal, és az egyes üvegszálak bevonási mennyiségét 30 ml -re és 50 ° C -on szárítottuk 24 órán keresztül. A gyors antigénteszt kolloid aranyozott egér egér anti-N protein monoklonális antitest és a kolloid aranyozott DNP-BSA protein konjugátum hígít 45 ° C 24 órán át. Az egér anti-N protein monoklonális antitestet és a nyúl anti-DNP poliklonális antitestet 0,01 mol/L pH7,4 és 5% -os trehalózt tartalmazó PBS-sel hígítottuk, 2,0 mg/ml és 1,0 mg/ml koncentrációra. A detektálási vonal (T vonal) és a minőség -ellenőrzési vonal (Cline )ként a rögzítési antitestet nitrocellulóz membránon (NC membrán) vontuk be, és 45 ° C -on 48 órán át szárítottuk. Az elkészített NC-filmet, a konjugált padot, a mintadarabot és a víz abszorpciós betétjét beillesztették a PVC alsó tányérra, 3 mm-re/csíkra vágva, egy kartonba helyezve és egy alumínium fóliazsákba csomagolva. A teszt során helyezze be az nasopharyngealis tamponot az emelőcsőbe, amelyet előre töltünk az extraháló oldattal (10 mmol/LPBS, ph7,4, 1%NP-40), és adjunk hozzá 3 csepp (100 μl) cseppként a tesztkártya mintajukát az extrahálás után 15 másodpercig. 15 perc reakcióidő a vizuális értelmezéshez. Az antigén teszt T vonal és a cin egyaránt pozitív, a T vonal nem színes, a cline negatív, a cikk nem színezett, jelezve, hogy a tesztcsík hatékony, és újra kell tesztelni.

Minimális észlelési határérték

A minimális detektálási határvizsgálatokat hővel elpusztított vírustenyészetekkel végeztük. Az egészséges emberek nasopharyngealis tamponjaiból származó eluálást használtuk az antigénteszt negatív mátrixaként. Először egy 10-szeres gradiens hígítást végeztünk. A gyors antigénteszt negatív eredménye után az előző koncentráció akkor kétszeres gradiens hígítás volt, és a 20 tesztből legalább 19-szer volt pozitív. A koncentrációs szintet (≥95%) használtuk a reagens minimális detektálási határértékeként.

Stabilitási teszt

Helyezze az elkészített antigén teszt kész reagenskártyát egy 50 ° C -os sütőbe, és kéthetente tesztelje magas és alacsony koncentrációjú minőség -ellenőrző anyagokkal. Ismételje meg a tesztet háromszor az egyes mintákra. A sáv mélységének különbsége a magas hőmérsékleten gyorsított pusztító reagens és a kontroll reagens között 1 hét és 8 hét között.

A fentiek a releváns információk a kolloid arany oldat előkészítéséről az antigén teszthez. Ha érdekli a COVID-19 gyors antigénteszt , a SARS-COV-2 gyors antigén teszt, akkor lépjen kapcsolatba velünk. Weboldalunk a www.bioteke.cn.